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產品名稱:SURE菌株(ZK231)

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ZK231 0.3ml/支 380 - + 有貨

■ 產品介紹

SURE(Stop Unwanted Rearrangement Events)感受態細胞是設計用來克隆在傳統菌株中無法克隆的DNA片段序列的菌株。SURE感受態菌株缺乏催化重組和刪除非標準二級結構和三級結構, 例如十字形(由反向重復序列導致)和Z字形的DNA序列的組件。這些非標準二級結構和三級結構在真核細胞中經常出現,而且這些結構能夠阻礙真核細胞DNA 在傳統菌株中的克隆。sure感受態細胞是限制性內切酶陰性的(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-),核酸內切酶(endA)缺陷,和重組酶(recB recJ)缺陷的。同時sure感受態細胞中所具有的F' 游離基因上面的lacIqZΔM15基因,使得能夠利用藍白斑進行克隆篩選。                  

基因型為:E. coli B e14-(McrA-) Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)171 endA1 gyrA96 thi-1 supE44 relA1 lac recB recJ sbcC umuC::Tn5 (KanR) uvrC [F' proAB lacIqZΔM15 Tn10 (TetR)].


■ 產品特點

SURE感受態細胞主要是用來克隆不穩定DNA結構,大腸桿菌DNA修復系統會針對重復序列、二級結構(如Z-DNA)等真核DNA進行重排或刪除修飾。SURE感受態細胞針對uvrC,umuC,SbcC和RecJ等參與修飾的大腸桿菌基因或蛋白進行突變,提高了真核來源、不規則DNA的穩定性達20倍以上,并且適合克隆甲基化DNA。

本身具有Kana和Tet抗性。當轉化氯霉素抗性質粒到sure感受態細胞中時,一定要用100μg/ml的氯霉素平板去篩選。因為sure感受態細胞在40μg/μl的氯霉素條件下具有抗性,而對于100μg/μl的氯霉素抗生素具有敏感性。

sure感受態細胞可以用于藍白斑篩選,具有laz互補基因。

在載體構建過程中,我們經常會遇到一些基因片段具有高度的重復,這導致插入載體中的序列可能會在細菌擴增中不穩定,在質粒擴增中產生形成片段的缺失和重排,如發現插入片段高頻率地產生缺失和重排,可以嘗試使用重組缺陷大腸桿菌菌株,例如sure感受態細胞。


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